应用化学发光法检测核酸杂交

固定在膜上核苷酸序列已有许多不同的非放射性检测方法。最普通的方法是在杂交探针上附加一种酶。将这种酶在杂交前与探针共价连接,或者在杂交后与探针结合。然后将膜与信号显示底物一起保温处理就可看见杂交的目的顺序位置。最常用的底物系统是色原性的,色原性系统在酶的作用下在膜上沉淀出不溶性染料。通过最佳的色原性系统可在膜上检测出约2×10~(-6)mol的酶(表Ⅰ)。从理论上讲,底物所能检出的酶的摩尔数越低,能检测目的DNA或RNA的量就越小。