| 绵羊GM-CSF原核表达及蛋白功能检测 |
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| 引用本文： | 李蕊,陈创夫,盛金良,张辉,杨霞,黄林,刘志方,王讲德,监通,李天森. 绵羊GM-CSF原核表达及蛋白功能检测[J]. 生物技术, 2012, 22(5) |
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| 作者姓名： | 李蕊 陈创夫 盛金良 张辉 杨霞 黄林 刘志方 王讲德 监通 李天森 |
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| 作者单位： | 1. 新疆石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832003
2. 新疆石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆 石河子,832003 |
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| 摘 要： | 目的:构建GM-CSF原核表达载体,并诱导表达、纯化其蛋白.方法:将GM-CSF基因克隆至原核表达载体pET-32中,转化至BL21中,用智能蛋白质多维纯化系统(AKTAxpressTM)纯化目的蛋白,利用MTT法测定GM-CSF融合蛋白对绵羊外周血淋巴细胞的增殖活性.结果:成功获得了435bp的绵羊GM-CSF基因片段,诱导表达了35kDa融合蛋白GM-CSF,其纯度达95％以上,浓度达860mg/mL;通过MTT证明该融合蛋白对绵羊淋巴细胞具有增殖活性,其作用最明显的蛋白浓度是200μg/mL.结论:成功获得重组蛋白GM-CSF,该蛋白具有较好的生物活性,为免疫增强佐剂的开发奠定了基础.
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| 关 键 词： | 绵羊 GM-CSF 蛋白表达 蛋白纯化 细胞增殖试验 |
Prokaryotic Expression of GM-CSF and Protein Function Tested |
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| LI Rui , CHEN Chuang-fu , SHENG Jin-liang , ZHANG Hui , YANG Xia , HUANG Lin , LIU Zhi-fang , WANG Jiang-de , JIAN Tong , LI Tian-sen. Prokaryotic Expression of GM-CSF and Protein Function Tested[J]. Biotechnology, 2012, 22(5) |
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| Authors: | LI Rui CHEN Chuang-fu SHENG Jin-liang ZHANG Hui YANG Xia HUANG Lin LIU Zhi-fang WANG Jiang-de JIAN Tong LI Tian-sen |
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