| 人Aurora B基因的克隆、原核表达及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 邱贤秀,周莹,王雪琦,丁伟超,刘忠,王绍祥,王一飞. 人Aurora B基因的克隆、原核表达及生物信息学分析[J]. 生物技术, 2012, 22(5) |
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| 作者姓名： | 邱贤秀 周莹 王雪琦 丁伟超 刘忠 王绍祥 王一飞 |
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| 作者单位： | 1. 暨南大学生物医药研究开发基地,广东广州510632;暨南大学药学院,广东广州510632
2. 暨南大学生物医药研究开发基地,广东广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家"十二·五"科技支撑计划项目，广东省自然科学基金青年基金项目，国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆出人AuroraB基因,并将其于大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达,获得重组蛋白.方法:利用TRIzol Reagent 法提取食管癌ECa 109细胞总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩增Aurora B基因,构建pET 28a(+)-Aurora B重组质粒,将其转化Rosetta(DE3)菌株,IPTG体外诱导表达重组蛋白.利用生物信息学工具对Aurora B的核酸序列和蛋白功能结构进行分析.结果:成功构建了pET 28a(+)-AuroraB重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的人Aurora B基因序列同源性达到了99％；获得AuroraB蛋白,大小约39kDa,蛋白表达量约占菌体总蛋白的28％.结论:对人AuroraB基因进行克隆、原核表达及生物信息学分析,为深入研究Aurora B在细胞周期调控中的作用机制及后续Aurora B抑制剂的体外筛选奠定基础.
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| 关 键 词： | 极光激酶 B细胞周期 克隆 原核表达 生物信息学 |
Cloning,Prokaryotic Expression and Bioinformatics Analysis of Human Aurora B Gene |
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| QIU Xian-xiu , ZHOU Ying , WANG Xue-qi , DING Wei-chao , LIU Zhong , WANG Shao-xiang , WANG Yi-fei. Cloning,Prokaryotic Expression and Bioinformatics Analysis of Human Aurora B Gene[J]. Biotechnology, 2012, 22(5) |
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| Authors: | QIU Xian-xiu ZHOU Ying WANG Xue-qi DING Wei-chao LIU Zhong WANG Shao-xiang WANG Yi-fei |
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