豹猫体细胞建系及其生物学特性分析 |
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引用本文: | 刘建,徐晓荣,李云霞,李慧鹏,高原,李瑶,曹贵方,包斯琴,李喜和.豹猫体细胞建系及其生物学特性分析[J].动物学杂志,2018,53(3):427-438. |
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作者姓名: | 刘建 徐晓荣 李云霞 李慧鹏 高原 李瑶 曹贵方 包斯琴 李喜和 |
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作者单位: | 内蒙古大学蒙古高原动物遗传资源研究中心;内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司;内蒙古农业大学生命科学学院 |
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基金项目: | 蒙古高原动物遗传资源库建立与利用项目内蒙古重点科技项目(No. 20130216) |
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摘 要: | 研究体外培养豹猫(Prionailurus bengalensis)细胞的形态、细胞贴壁率、冷冻存活率、生长曲线及细胞核型等生物学特性,为深入开展豹猫基因组学及濒危野生动物保护提供依据。本实验选择豹猫3种组织,即剑状软骨、心和肺,采用组织块贴壁培养法进行体细胞的原代培养;酶消化法完成细胞的传代培养;程序降温完成细胞的冷冻保存;通过细胞计数法计数细胞冷冻存活率;绘制细胞生长曲线;采用常规染色体标本制备技术,对豹猫的染色体核型及G带进行分析。细胞原代培养结果显示,剑状软骨组织在培养第3天出现纤维样细胞、培养6~7 d铺满培养瓶;心组织在培养第5天出现上皮样细胞、12 d铺满培养瓶;肺组织在培养4 d后出现成纤维细胞、8~9 d铺满培养瓶。3种来源体细胞均显示成纤维细胞特征,剑状软骨源细胞最易贴壁、肺源细胞次之、心源细胞最弱。对比3种不同来源体细胞从6代(P6)至12代(P12)冷冻存活率,剑状软骨源细胞冷冻存活率显著下降(冻存前91.0%~97.6%,冻存后76.8%~85.5%,P0.05),心源细胞冷冻存活率亦显著下降(冻存前82.7%~88.1%,冻存后43.7%~80.5%,P0.05),肺源细胞冷冻存活率有下降趋势,但无显著差异(冻存前83.4%~96.8%,冻存后73.9%~93.3%,P0.05)。生长曲线分析显示,3种体细胞均呈"S"型,其中剑状软骨源细胞增殖最快、肺源细胞次之、心源细胞最慢。核型分析结果显示,3种不同来源的成纤维体细胞染色体数目均为2n=38,18对为常染色体,形态类型为6m+10sm+2st,1对为性染色体,X染色体形态类型为m。本研究建立了3种组织来源的豹猫成纤维细胞建系技术及体细胞系,揭示了该物种成纤维细胞的基本生物学特性,为动物遗传信息研究及豹猫保护提供了重要的实验材料和基础信息。
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关 键 词: | 豹猫 成纤维细胞 细胞生长曲线 冷冻存活率 核型 |
收稿时间: | 2017/8/17 0:00:00 |
修稿时间: | 2018/4/26 0:00:00 |
Establishment of Fibroblast Cell Lines from Leopard Cat and Their Biological Characteristics |
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Abstract: | |
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Keywords: | Leopard Cat Prionailurus bengalensis Fibroblast cells Cell growth curve Frozen survival rate Karyotype |
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