人血清高密度脂蛋白主要载脂蛋白的分离纯化及其多态现象

本文报道人血清高密度脂蛋白(HDL)的主要载脂蛋白(apoHDL)的分离纯化和其多态型(Polymorphism,Isoform)的初步研究。首先用硫酸右旋糖酐沉淀,结合角度头密度梯度超速离心的方法,从人血清中提取高密度脂蛋白。分离纯化的高密度脂蛋白在0.5％琼脂糖和3.75％聚丙烯酰胺电泳中显示一条带,经0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺电泳鉴定未发现有血清白蛋白的污染。纯的HDL在低温下用醇醚混合液脱脂获得载脂蛋白(apoHDL)。经过Sephadex G-200凝胶过滤柱,apoHDL被分为五个蛋白峰。0.1％SDS-10％聚丙烯酰胺凝胶电泳的鉴定表明峰Ⅰ、峰Ⅱ为载脂蛋白聚集体,主要含apoA-Ⅰ和apoE;峰Ⅲ为纯的apoA-Ⅰ;峰Ⅳ含有apoA-Ⅱ、apoC和apoA-Ⅰ;峰V主要为apoC。令人感兴趣的是,经聚丙烯酰胺等电聚焦电泳鉴定apoA-Ⅰ有八种多态型。这些结果对于深入研究载脂蛋白的结构、功能和代谢,对于研究高密度脂蛋白的亚类及其抗动脉粥样硬化的机理都是有益的。