大鼠iNOS基因上游调控区在转录激活中的作用

为了探讨大鼠ｉＮＯＳ基因上游调控区不同部位在对细胞因子诱导应答中所起的作用，将调控区不同部位插入ｐＳＶ０－ＣＡＴ报告基因载体，转染体外培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），经ＩＬ－１β诱导后，采用氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）活性测定和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交，检查了调控区各部位在ＩＬ－１β诱导ｃａｔ表达中所起的作用．结果表明，被转染的细胞在未经ＩＬ－１β刺激时，各种调控区序列启动ｃａｔ表达的活性均很低．在ＩＬ－１β作用下，调控区远端序列（－１０３７～－４３８）、近端序列（－４３７～＋４６）和全长序列（－１０３７～＋４６）均能独立激活ｃａｔ表达，其中以全长序列的作用最强，表明ｉＮＯＳ基因表达调控区远端和近端序列均具有启动子和增强子样功能．同时证实，远端序列和近端序列单独启动ｃａｔ表达的活性分别为全长序列的９１．３％和６７．１％，揭示大鼠ｉＮＯＳ基因调控区远端序列在介导ＩＬ－１β的应答反应中发挥更重要作用．