人IFN-γ体外释放检测法的建立及其在结核病诊断中的应用 |
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作者姓名: | 陈颖钰 邓铨涛 詹枝华 郭爱珍 项杰 陈军 周金海 曾庆志 杜义祥 魏武 童庆伟 晁彦杰 匡有吉 陈焕春 |
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作者单位: | 1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室,武汉,430070 2. 武汉市结核病医院,武汉,430083 3. 武汉市结核病防治所,武汉,430030 4. 华中农业大学校医院,武汉,430070 5. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室,武汉,430070 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973计划),湖北省武汉市科技攻关项目,国家科技攻关项目 |
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摘 要: | 本研究旨在建立人IFN-γ体外释放检测法,用于人结核病的特异性诊断.克隆表达了人IFN-γ基因,利用纯化的重组IFN-γ免疫小鼠,获得两株高效价的单克隆抗体.用所获得的单克隆抗体及兔抗IFN-γ多克隆抗体建立了检测人IFN-γ的夹心ELISA,检测灵敏度达到31.25 pg/mL.采集111位结核病阳性病人与292位临床健康对照者肝素抗凝全血,利用结核菌特异性抗原ESAT-6/CFP-10融合蛋白体外刺激外周血淋巴细胞释放IFN-γ,用所建立的夹心ELISA及商品化试剂盒平行检测所有样本,结果表明两种方法的检测结果相符.结核患者的检测灵敏度为95.5%,健康对照的阳性检出率为16.7%,患者与健康对照的阳性检出率差异极显著(P<0.01),证实所建立的方法灵敏度与特异性均很高,具有良好的应用前景.
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关 键 词: | 结核病 IFN-γ 诊断 单克隆抗体 |
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