Ｏ１３９霍乱弧菌质粒基因组文库的建立及Ｏ—抗原基因的筛选

合成Ｏ－抗原的基因是串联在一起的一个基因族，提取Ｏ１３９霍乱弧菌基因组ＤＮＡ，限制性内切酶ＥcoＲ２Ⅰ酶切，电泳回收４－２０kb的ＤＮＡ片段，构建质粒基因组文库。随机筛选重组克隆，获得一株可与Ｏ１３９霍乱弧菌抗菌清发生凝集反应的重组克隆，命名为大肠杆菌ＤＨ５α（pMG320)。经鉴定分析重组克隆所表达的Ｏ－抗原具有良好的免疫性及反应原性。酶切分析质粒pMG320，推知其Ｏ－抗原基因大 ４．６kb.这为今后Ｏ１３９霍乱疫苗的研制及Ｏ１３９霍乱弧菌Ｏ－抗原基因的结构和功能研究提供了条件。