| 集胞藻类金属硫蛋白的纯化,性质和溶液构象的研究 |
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| 引用本文： | 陈正佳 施定基. 集胞藻类金属硫蛋白的纯化,性质和溶液构象的研究[J]. Acta Botanica Sinica, 1999, 41(2): 150-155 |
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| 作者姓名： | 陈正佳 施定基 |
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| 作者单位： | 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京，10087(陈正佳，李晓凡，李玲媛)，中国科学院植物研究所!北京，100096(施定基)，北京大学(茹炳根) |
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| 基金项目： | 国家九五攻关项目!960020405 |
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| 摘 要： | 集胞藻Synechocysitissp.PCC6803光照培养，加入100μmol/LZnCl2诱导藻内类金属硫蛋白（MT-like）的表达。离心收集鲜藻，超声波破碎细胞，离心除沉淀。上清液72℃加热3min去杂蛋白，离心，上清液依次经过分子筛层析柱，阴离子交换柱和脱盐柱，可得蓝藻类金属硫蛋白。5L培养液收集鲜藻7.6g，一次上样1．52g鲜藻的裂解物，冻干后得15mg纯化的蛋白样，为鲜藻重的0．1％．经分析其等电点为pH4．5，分子量为6．986kD，由58个氨基酸残基组成。其序列中含有较多疏水氨基酸残基（36％），但其半胱氨酸含量仅为5％。CD（圆二色性）图谱表明其二级结构主要为无规卷曲，不含α－helix和β-sheet，无哺乳动物的金属硫蛋白所具有的典型双结构域结构。紫外吸收光谱表明Zn结合的类金属硫蛋白在220nm也有较高的吸收值。红外光谱分析的结果表明，此类金属硫蛋白的吸收光谱与高等动物的金属硫蛋白的吸收光谱类似。
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| 关 键 词： | 集胞藻 类金属硫蛋白 分离和纯化 性质 溶液构象 |
Studies on the Purification, Characterization and Conformation in Solution of Metallothionein-like Substance from Synechocystis 6803 |
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| CHEN Zheng-Jia, LI Xiao-Fan, SHI Ding-Ji,LI Ling-Yuan, RU Bing-Gen. Studies on the Purification, Characterization and Conformation in Solution of Metallothionein-like Substance from Synechocystis 6803[J]. , 1999, 41(2): 150-155 |
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| Authors: | CHEN Zheng-Jia LI Xiao-Fan SHI Ding-Ji LI Ling-Yuan RU Bing-Gen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Synechocysits sp. PCC 6803 Metallothionein-like compound Isolation and purification Characteriation Conformation in solution |
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