南芥菜花叶病毒卫星RNA及其核酶的结构分析

以提纯的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus，ArMV)卫星RNA(sArMV)为模板，以合成的DNA寡核苷酸为引物，经过反转录—PCR扩增合成全长的dscDNA。Ds cDNA的两端连接EcoRI Adaptors插入到经EcoRI酶解的脱磷酸化的pUC 9质粒中，转化E．Coli JM83。用32P标记的sArMV为探针进行菌落原位杂交和EcoRI酶解分析，筛选出含有全长cDNA片段的克隆。用Taq TrackRsequcingSystems。脚的序列分析表明：克隆的sAxMV cDNA由300bp脱氧核糖核苷酸组成，与其RNA序列分析的结果相同，含有一个首尾相连的由54个核苷酸组成的核酶，具有完整的垂头状结构及能自我切割5'GUC↓3'的生物功能。