| 重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性 |
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| 引用本文： | 王秋玲,徐倩倩,张婷婷,赵文钧,陈玉秋,齐甜铭,马得莹.重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性[J].微生物学通报,2016,43(9):1973-1979. |
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| 作者姓名： | 王秋玲 徐倩倩 张婷婷 赵文钧 陈玉秋 齐甜铭 马得莹 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学动物科技学院 黑龙江 哈尔滨 150030 |
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| 基金项目： | 教育部博士点基金项目(No. 20122325110016)；哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(No. 2013RFXXJ019)；黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(No. PC13S02) |
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| 摘 要： | 【目的】研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性。【方法】采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12(Av BD12)基因亚克隆到表达载体p Pro EX-HTa上,构建重组表达质粒。将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化。进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性。【结果】经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅Av BD12重组蛋白分子量约为12 k D,大部分以包涵体形式存在。该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性。此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性。【结论】该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性。
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| 关 键 词： | 鹅β-防御素12，重组蛋白，抗菌活性 |
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