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人尿道(阴茎)鳞癌上皮细胞(HUS-98)cDNA文库的构建及鉴定
引用本文:冯爱娟,杨太成,刘耘,冼江. 人尿道(阴茎)鳞癌上皮细胞(HUS-98)cDNA文库的构建及鉴定[J]. 氨基酸和生物资源, 2005, 27(1): 56-59,69. DOI: 10.3969/j.issn.1006-8376.2005.01.017
作者姓名:冯爱娟  杨太成  刘耘  冼江
作者单位:广州军区广州总医院医学实验科,510010;华南理工大学生物科学与工程学院,510640,广州;广州军区广州总医院医学实验科,510010;华南理工大学生物科学与工程学院,510640,广州
摘    要:为了进一步分离人尿道(阴茎)鳞癌组织特异性表达基因和鳞癌特异性相关基因,采用SMART技术,构建了人尿道 (阴茎)鳞癌上皮细胞cDNA文库,从人尿道(阴茎)鳞癌上皮细胞中分离总RNA并纯化mRNA,利用经修饰的oligo(dT)引物 合成cDNA第一链,利用SMART核苷酸作为cDNA第一链在mRNA5′端延伸出去的模板,采用LD-PCR合成双链cDNA,双链 cDNA经酶切和过柱分级分离后,克隆入λTriplEx2载体后经体外包装而成cDNA文库。结果表明原始人尿道(阴茎)鳞癌上 皮cDNA文库获得1.57×107个重组子,重组率达到98%。文库扩增后,滴度达到4.0×109pfu/ml,插入cDNA平均长度为2.5kb。 构建的人尿道(阴茎)鳞癌上皮cDNA文库具有良好的质量,该cDNA文库为进一步筛选鳞癌抑癌基因及鳞癌特异性表达基因 奠定了基础。

关 键 词:尿道  鳞癌  cDNA文库
文章编号:1006-8376(2005)01-0056-04

Construction and Identification of Carcinoma Cell(HUS-98 Cell) cDNA Library of Human Urethral(Penis) Squamous Cells
FENG Ai-juan,YANG Tai-cheng,LIU Yun,XIAN Jiang. Construction and Identification of Carcinoma Cell(HUS-98 Cell) cDNA Library of Human Urethral(Penis) Squamous Cells[J]. Amino Acids & Biotic Resources, 2005, 27(1): 56-59,69. DOI: 10.3969/j.issn.1006-8376.2005.01.017
Authors:FENG Ai-juan  YANG Tai-cheng  LIU Yun  XIAN Jiang
Affiliation:FENG Ai-juan 1,2,YANG Tai-cheng 1,LIU Yun 2,XIAN Jiang 1
Abstract:
Keywords:urethral(penis)  squamous cell of carcinoma(SCC)  cDNA library
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