高密度发酵生产突变型重组人肿瘤坏死因子rhTNFα-DK2的研究

通过对发酵基质和发酵关键参数的优化，确定了发酵培养基的磷酸盐浓度为０．１５Ｍ，甘油浓度为１．２ｍｌ／Ｌ，补料中甘油浓度为２０ｍｌ／Ｌ，发酵过程中溶解氧控制在３０％～６０％，ｐＨ控制在６．８５左右。在５Ｌ在ＮＢＳ－Ｂｉｏｆｌｏ３０００型自动控制发酵罐中采取加速补料的补料分批培养，重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ经１０ｈ３０°Ｃ培养和５ｈ４２°Ｃ诱导培养，最终密度达到６０ＯＤ６００，ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２的表达量占菌体总蛋白的５０％以上，每升发酵液纯化可得到近２ｇ的ｒｈＴＮＦα－ＤＫ２。