膨大弯颈霉中与Bmt生物合成相关的PKS基因功能研究 |
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引用本文: | 杨秀青,李丝竹,徐康,刘美洁,郭立忠,于浩.膨大弯颈霉中与Bmt生物合成相关的PKS基因功能研究[J].菌物学报,2023(8):1691-1700. |
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作者姓名: | 杨秀青 李丝竹 徐康 刘美洁 郭立忠 于浩 |
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作者单位: | 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32000041);;山东省自然科学基金(ZR2020QC005)~~; |
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摘 要: | 环孢霉素A是一种主要由膨大弯颈霉Tolypocladium inflatum产生的环肽类次级代谢产物,临床上被广泛用作免疫抑制剂,其合成需要特殊底物(4R)-4-(E)-2-butenyl]-4-methyl-L-threonine (Bmt),但目前相关Bmt的研究很少。基因敲除实验证实Bmt的生物合成需要一个聚酮合酶(polyketosynthase,PKS)基因(simG)参与,并推测其功能为合成Bmt的前体化合物羧酸分子3(R)-hydroxyl-4(R)-methyl-6(E)-octenoicacid(B1)。本研究通过在同为虫生真菌的球孢白僵菌Beauveriabassiana中异源表达simG,以证明该基因的功能。通过克隆获得了较大基因simG,利用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导方法将该基因转化到球孢白僵菌中,通过基因检测和半定量RT-PCR筛选出目标基因表达量高的菌株,获得4株simG高表达菌株。将其发酵培养后,利用LC-MS检测发酵产物,发现在simG高表达菌株中存在与B1分子量相同的产物峰。本研究进一步证明了simG负责化合物B...
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关 键 词: | 环孢霉素 Bmt 膨大弯颈霉 生物合成 异源表达 |
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