茯苓原生质体单核化及同核体杂交

茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌，在我国栽培历史悠久，但由于长期无性繁殖，导致菌种退化，栽培产量下降，严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题，我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法，明确了其交配系统，建立了单孢同核体杂交育种体系，但是部分茯苓菌株子实体形成困难或子实体贴生，导致担孢子收集困难，因此原生质体单核化的研究具有重要意义。本研究以两株存在较大遗传差异且同核体类型不同的菌株776和775为材料，核荧光染色表明超过60%的原生质体具有细胞核，原生质体再生率分别为11.0%和7.6%，不易生长的再生菌株中既有同核也有异核菌株。原生质体单核化获得了两个菌株的同核体菌株，比例可达到10%以上，菌株776获得了两种交配型的同核体菌株(5:3)，不存在偏分离(χ²=0.5)，但菌株775原生质体单核化仅获得了一种交配型的同核体菌株，表现出严重的交配型偏分离。通过杂交菌株与两亲本对峙试验及基于rpb2的杂合位点验证，证实获得了原生质体同核体杂交菌株25株，原生质体同核体与单孢同核体杂交菌株50株，表明茯苓原生质体同核体杂交育种的可行性。