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两种方法制备模板DNA在PCR-SSCP中的应用研究
引用本文:杨海兵,杨胜林,戴焰,徐龙鑫,李爱萍,丁磊磊.两种方法制备模板DNA在PCR-SSCP中的应用研究[J].生物技术,2012,22(6).
作者姓名:杨海兵  杨胜林  戴焰  徐龙鑫  李爱萍  丁磊磊
作者单位:1. 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳,550025
2. 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵州贵阳550025
3. 贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州省畜牧兽医研究所,贵州贵阳550005
基金项目:教育部美大项目,贵州省国际合作项目,浙江大学基本科研业务费专项资金
摘    要:目的:比较两种方法(DNA试剂盒提取法和FTA卡法)提取的DNA在PCR-SSCP反中的可靠性.方法:用DNA试剂盒从全血中提取DNA和用NaOH方法从FTA卡中提取DNA后,用分光光度计检测两种方法提取DNA的浓度及纯度,进行PCR反应之后,用2%的琼脂糖凝胶电泳检测其质量,接着进行SSCP检测,观测其效果.两种方法提取的样品相同,进行PCR反应和SSCP检测的条件完全一致.结果:用DNA试剂盒提取法和FTA卡法提取的DNA纯度分别为OD260/280=1.817,OD260/280=1.806.48份贵州荷斯坦奶牛DNA后续PCR反应和SSCP的检测结果表明,两种方法提取的DNA用于PCR反应和SSCP检测其效果没有明显差别,成功率为100%.结论:FTA卡结合DNA较稳定,用NaOH法提取DNA效果可靠且比试剂盒方法简便、快捷、经济,值得推广.

关 键 词:NaOH方法  FTA卡  提取DNA  血样保存  PCR-SSCP

Research on Application of PCR-SSCP in Preparation of Sample DNA with Two Methods
YANG Hai-bing , YANG Sheng-lin , DAI Yan , XU Long-xin , LI Ai-ping , DING Lei-lei.Research on Application of PCR-SSCP in Preparation of Sample DNA with Two Methods[J].Biotechnology,2012,22(6).
Authors:YANG Hai-bing  YANG Sheng-lin  DAI Yan  XU Long-xin  LI Ai-ping  DING Lei-lei
Abstract:
Keywords:
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