| 登革2型病毒E蛋白在酵母菌中的分泌表达 |
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| 引用本文： | WEI Hui yong\ \{,\},JIANG Li fang\ \{\},XUE Yao hua\ ,GUO Hui yu\ .登革2型病毒E蛋白在酵母菌中的分泌表达[J].Virologica Sinica,2002(3). |
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| 作者姓名： | WEI Hui yong\ \{ \} JIANG Li fang\ \{\} XUE Yao hua\ GUO Hui yu\ |
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| 作者单位： | 广东省人民医院老年医学研究所，中山医科大学微生物学教研室，中山医科大学微生物学教研室，中山医科大学微生物学教研室 广东广州510080中山医科大学微生物学教研室，广东广州510089，广东广州510089，广东广州510089，广东广州510089 |
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| 摘 要： | 以 pPICZαB为载体 ,应用RT PCR从感染D2V的C6 / 36病变细胞中克隆全长E基因 ,电转化法将重组质粒整合入巴斯德毕赤氏酵母菌 ,经抗生素筛选、表型鉴定和PCR分析得到Mut 型的多拷贝整合菌 ,经甲醇诱导培养可产生 6 9kD的融合蛋白 ,与含组氨酸尾的D2V包膜糖蛋白分子量理论值相符 ;免疫印迹证实该表达产物可与D2VE特异性单抗和D2V多抗进行反应 ;表达产物经金属螯合亲和层析可获得纯化的含组氨酸尾的E融合蛋白并保留其免疫反应性。研究显示克隆的全长D2VE基因可在毕赤氏酵母菌中高效分泌表达 ,E融合蛋白最大表达量 0 .1g/L。
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| 关 键 词： | 登革病毒 E蛋白 分泌表达 毕赤氏酵母菌 |
Secreted Expression of D2V Envelope Glycoprotein in Pichia pastoris |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dengue virus E glycoprotein Secreted expression Pichia pastoris |
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