| 重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究 |
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| 引用本文： | 司文,周世冠,刘宝山,白爽,王蒙,王桂珍. 重组肺炎支原体CARDS毒素蛋白临床检测应用的初步研究[J]. 中国微生态学杂志, 2015, 0(11) |
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| 作者姓名： | 司文 周世冠 刘宝山 白爽 王蒙 王桂珍 |
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| 作者单位： | 中国医科大学,中国医科大学,沈阳农业大学,中国医科大学,中国医科大学,中国医科大学 |
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| 摘 要： | 目的初步探讨肺炎支原体CARDS毒素蛋白在检测肺炎支原体感染中的应用价值。方法 PCR扩增CARDS毒素基因并连接到PMD-19-T载体,经酶切、PCR及核苷酸测序分析后,将CARDS毒素基因片段克隆到pGEX-6p-1表达载体内并转入受体菌。IPTG诱导大肠埃希菌BL21重组株(pGEX-6p-1-CARDS)的表达。GST柱层析纯化重组CARDS毒素蛋白,以该重组蛋白和重组P1蛋白为抗原建立间接ELISA方法,检测85份感染肺炎支原体的血清标本,并与重组P1蛋白的ELISA结果进行比较。结果 CARDS毒素蛋白表达载体构建成功并表达大小为43kDa的重组蛋白,Western blot测定其能与兔抗Mp多价抗血清发生反应。ELISA结果显示,CARDS毒素蛋白的阳性率为70.59%(60/85),重组P1蛋白的阳性率为63.53%(54/85)。结论本研究成功构建了CARDS毒素蛋白表达载体并获得了稳定表达的重组菌株;在诊断肺炎支原体感染的血清学ELISA试验中,重组CARDS毒素蛋白的敏感性高于重组P1蛋白,为Mp感染的诊断提供了新的可用抗原。
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| 关 键 词： | 肺炎支原体；CARDS毒素蛋白；ELISA；临床检测 |
Clinical application of recombinant Mycoplasma pneumoniae CARDS toxin protein in detection of Mycoplasma pneumoniae: a preliminary study |
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