| 以杆状病毒为载体在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV VP2基因 |
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| 引用本文： | 葛菁萍,高冬妮,楼庄伟,平文祥.以杆状病毒为载体在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV VP2基因[J].微生物学报,2009,49(9):1259-1264. |
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| 作者姓名： | 葛菁萍 高冬妮 楼庄伟 平文祥 |
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| 作者单位： | 微生物黑龙江省高校重点实验室,黑龙江大学生命科学学院,哈尔滨,150080 |
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| 基金项目： | 教育部留学回国人员启动基金；黑龙江省自然科学基金（D0249）；黑龙江省教育厅骨干教师项目资助计划（1055G034）；黑龙江大学杰出青年基金（JC200310）；黑龙江大学青年教师基金（QL200815） |
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| 摘 要： | 摘要：【目的】本研究旨在构建在鸡原代骨骼肌细胞中表达IBDV病毒VP2基因的重组杆状病毒。【方法】从IBDV适应细胞毒中提取RNA，用RT-PCR技术扩增VP2基因，将其克隆到自主构建的杆状病毒转移载体的CMV启动子之下，通过Bac-to-Bac系统获得VP2重组Bacmid，并将其转染Sf9昆虫 细胞，获得了VP2重组杆状病毒。重组病毒经扩增后以50个MOI感染鸡原代骨骼肌细胞，接种72h后裂解细胞收获蛋白。【结果】蛋白样品经SDS-PAGE和Western blot证实VP2蛋白获得表达，分子量约48kDa，与预测蛋白大小一致，且能被IBDV阳性血清所识别。【结论】重组杆状病毒可以有效地将VP2基因导入鸡原代细胞，并在CMV的启动下表达具有抗原性的VP2蛋白，本研究为研制IBDV及其他重要禽类传染病的杆状病毒载体疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 关键词：IBDV VP2基因 杆状病毒 鸡原代骨骼肌细胞 表达 |
| 收稿时间： | 2009/4/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2009/6/23 0:00:00 |
The expression of IBDV VP2 in chicken primary myoblast cells using the baculovirus vector |
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| Jingping Ge,Dongni Gao,Zhuangwei Lou and Wenxiang Ping.The expression of IBDV VP2 in chicken primary myoblast cells using the baculovirus vector[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(9):1259-1264. |
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| Authors: | Jingping Ge Dongni Gao Zhuangwei Lou and Wenxiang Ping |
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| Institution: | Key Laboratory of Microbiology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin 150080, China;Key Laboratory of Microbiology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin 150080, China;Key Laboratory of Microbiology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin 150080, China;Key Laboratory of Microbiology, College of Life Science, Heilongjiang University, Harbin 150080, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: IBDV VP2 protein baculovirus chicken primary myoblast cell expression |
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