重组牛乳源金黄色葡萄球菌GapC蛋白优势B细胞抗原表位的预测和筛选 |
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引用本文: | 陈晓萌,张雪静,张欢,张宝江,苏艳.重组牛乳源金黄色葡萄球菌GapC蛋白优势B细胞抗原表位的预测和筛选[J].生物技术通报,2023(5):306-313. |
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作者姓名: | 陈晓萌 张雪静 张欢 张宝江 苏艳 |
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作者单位: | 新疆农业大学动物医学学院 |
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基金项目: | 新疆维吾尔自治区高校科研计划重点项目(XJEDU2018I009); |
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摘 要: | 旨在表达牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)GapC蛋白并对其B细胞抗原表位进行预测与鉴定,本研究利用实验室分离鉴定的S. aureus分离株15119扩增GapC基因并构建重组表达质粒pET-28a-GapC,诱导纯化得到分子量为44 kD重组蛋白GapC,以此免疫新西兰大白兔,获得特异多克隆抗体。利用生物信息学方法,对GapC蛋白的二级及三级结构进行分析,预测其B细胞抗原表位,并利用特异性抗体对筛选的表位进行鉴定。结果表明,GapC蛋白具有良好的免疫原性,筛选出7个线性B细胞抗原表位,利用兔抗重组GapC蛋白多克隆抗体鉴定得到了PL 5(221 IPEIDGKLDGGAQRVP236)多肽和PL 7(264KNASNESFGYTEDEIVSSDVVGM286)2个优势B细胞表位。本研究成功制备了GapC蛋白,预测并鉴定了2个优势抗原表位,为其嵌合表位疫苗的开发提供了技术支持。
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关 键 词: | 牛源金黄色葡萄球菌 GapC蛋白 表达 B细胞抗原表位 预测与鉴定 |
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