‘西伯利亚’百合LiCMK基因克隆及功能分析 |
| |
作者姓名: | 刘思佳 王浩楠 付宇辰 闫文欣 胡增辉 冷平生 |
| |
作者单位: | 1. 北京林木分子设计育种高精尖创新中心;2. 北京农学院园林学院;3. 中国林业科学研究院生态保护与修复研究所 |
| |
基金项目: | 国家重点研发计划(2018YFD1000400); |
| |
摘 要: | 4-二磷酸胞苷-2-C-甲基赤藓糖激酶(CMK)是萜类花香合成甲基赤藓糖醇磷酸(MEP)途径的关键酶,为揭示其对百合花香的调控作用,从‘西伯利亚’百合(Lilium ‘Siberia’)中克隆LiCMK基因,进行生物信息学分析,利用亚细胞定位确定蛋白位置,采用荧光定量PCR技术检测基因时空表达模式,并运用病毒诱导基因沉默(VIGS)方法瞬时沉默LiCMK,验证其功能。结果显示,LiCMK全长1 200 bp,编码399个氨基酸,属于IspE家族,与油棕(Elaeis guineensis)中的CMK相似度最高。LiCMK的表达随花期呈现先上升后降低的规律,在盛花期的表达量达到峰值,在花器官中的表达量明显高于茎、叶中的表达量。LiCMK蛋白定位于叶绿体中。LiCMK在百合中瞬时沉默后,LiCMK表达水平下降了约84%,主要的单萜合成基因表达量明显下降,月桂烯合酶基因(MYS)、罗勒烯合酶基因(OCS)和芳樟醇合酶基因(LIS)分别降低了57%、59%和63%,主要的单萜类化合物月桂烯、罗勒烯和芳樟醇释放量显著下降。结果表明,LiCMK基因对‘西伯利亚’百合单萜化合物的合成与花香释放有重要...
|
关 键 词: | ‘西伯利亚’百合 花香 LiCMK 基因克隆 表达分析 基因沉默 单萜化合物 调控 |
|