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检测大鼠血浆游离DNA的定量PCR方法的建立及意义
摘    要:目的:过度训练是体育界非常重要的问题,目前用多个指标的综合评定来判断是否有过度训练,尚无灵敏、特异的监控指标和简便的评价方法。本文建立检测大鼠血浆游离DNA(cell free DNA,cf DNA)的实时荧光定量PCR方法,并探讨血浆cf DNA水平能否成为反映大鼠过度训练的新监控指标。方法:12只雄性SD大鼠随机分为2组(n=6):安静组和过度训练组。过度训练组进行5周递增负荷的过度训练,每周运动6 d,运动的最后一天运动至力竭。力竭运动后36 h采集静脉血,检测大鼠血浆cf DNA、睾酮(T)和皮质酮(Cort)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和肌酸激酶(CK)的水平以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果:1所建立的方法能特异扩增大鼠血浆cf DNA;2与对照组相比,过度训练大鼠的血浆cf DNA水平显著增加(约为安静组的5.43倍);3血浆cf DNA与血浆T、Cort、T/C比值和MDA显著相关(相关系数分别为-0.729,0.854,-0.655和0.720);与T-AOC、GSH-Px、SOD和CK无相关性。结论:1建立检测大鼠血浆cf DNA的定量PCR方法;2过度训练大鼠的血浆cf DNA显著增加,且cf DNA与血浆T、Cort和T/C比值高度相关,提示血浆cf DNA是过度训练的新监控指标;3过度训练大鼠血浆cf DNA的增加可能与过度训练所致的氧化应激增强有关,可能与骨骼肌损伤关系不大。

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