胶质细胞谷氨酸转运体-1a反义寡核苷酸的设计及效果评价

目的:应用IDT公司的Antisense design software设计胶质细胞谷氨酸转运体-1a(GLT-1a)的反义寡核苷酸(AS-ODNs),并对其进行效果评价。方法:首先根据GLT-1a mRNA羧基末端特异序列,设计GLT-1a AS-ODNs;在此基础上,应用Western blot方法对设计的5条GLT-1a AS-ODNs抑制大鼠海马CA1区GLT-1a蛋白表达的效果进行评价。结果:序列为5’-GGTTCTTCCTCAACACTGCA-3’的GLT-1a AS-ODNs可特异性地抑制大鼠海马CA1区GLT-1a蛋白表达,而对GLT-1b的表达无影响。该AS-ODNs对sham和头孢曲松钠(Cef)诱导的大鼠GLT-1a的表达上调的抑制效果类似,均60%;对脑缺血预处理(CIP)诱导的大鼠海马CA1区GLT-1a蛋白表达的上调亦具有明显的抑制作用,抑制效果60%。结论:从设计的5条GLT-1a AS-ODNs中获得了可特异性抑制GLT-la表达的反义寡核苷酸序列。