| 利用SMART技术构建鸡肺酵母双杂交cDNA文库 |
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| 引用本文： | 赵素君,王红宁,杨鑫,张安云,周英顺.利用SMART技术构建鸡肺酵母双杂交cDNA文库[J].四川动物,2012,31(6). |
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| 作者姓名： | 赵素君 王红宁 杨鑫 张安云 周英顺 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学生命科学学院,动物疫病与食品安全四川省重点实验室,成都 610064;四川省畜牧科学研究院,成都 610066
2. 四川大学生命科学学院,动物疫病与食品安全四川省重点实验室,成都 610064 |
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| 基金项目： | 国家"863"计划;"家禽重要病毒病基因工程疫苗研究和创制" |
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| 摘 要： | 以1月龄SPF鸡肺为材料,用Trizol方法提取总RNA,并用mRNA纯化试剂盒纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA).合成的ds cDNA通过CHROMA SPINTM TE-400 Column进行纯化,纯化后的ds cDNA与线性pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞AH109中,以同源重组的方式,在酵母细胞内构建成鸡肺的cDNA文库.获得的文库容量为3.9 × 106 cfu,随机选取20个克隆进行PCR检测,插入片段大小集中在0.3～3.0 kb之间,平均插入片段约为1.4 kb左右,文库重组率为100％.结果表明该文库达到了高质量文库所应具备的条件,为酵母双杂交技术筛选与IBV-N相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础.
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| 关 键 词： | 禽传染性支气管炎病毒 鸡肺 酵母双杂交 cDNA文库 SMART技术 |
Construction of the Yeast Two-hybrid cDNA Library of Chicken Lung with SMART Technology |
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| ZHAO Su-jun
,
WANG Hong-ning
,
YANG Xin
,
ZHANG An-yun
,
ZHOU Ying-shun.Construction of the Yeast Two-hybrid cDNA Library of Chicken Lung with SMART Technology[J].Sichuan Journal of Zoology,2012,31(6). |
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| Authors: | ZHAO Su-jun WANG Hong-ning YANG Xin ZHANG An-yun ZHOU Ying-shun |
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| Abstract: | |
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