黑曲霉糖化酶高产株糖化酶cDNA的合成、克隆和序列分析

从黑曲霉糖化酶高产株T21分离总Poly(A)⁺RNA，经反转录合成cDNA，建立cDNA库。以糖化酶基因片段为探针从cDNA库进行筛选，阳性率达1．6％。由限制酶酶切图谱确定30％的阳性克隆携带全长的糖化酶cDNA。序列分析结果表明，菌株T21虽经多次诱变获得，但糖化酶基因编码区序列与文献报道的黑曲霉糖化酶基因编码区序列一致。从菌株T2l构建的cDNA库中含糖化酶cDNA插入片段的克隆的高比率充分证明，菌株T21中稳态糖化酶mRNA含量很高，显然这是突变株T21糖化酶高产的重要原因之一。