| 水稻EPSP合酶第一内含子增强外源基因的表达 |
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| 作者姓名： | 徐军望 冯德江 宋贵生 魏晓丽 陈蕾 伍晓丽 李旭刚 朱祯 |
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| 作者单位： | 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 国家“八六三”高技术研究发展计划(批准号:2001AA21204,2001AA222251)，国家自然科学重点基金(批准号:39989001)，国家转基因植物研究与产业化专项基金(批准号:J99-A-020) |
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| 摘 要： | 分离并克隆了水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的第一内含子(EPI). 序列分析表明, EPI长704 bp, GC含量为36.2%. 为进一步研究EPI序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响, 将EPI序列插入CaMV35S启动子和报导基因β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase, GUS)基因(gus)之间. 采用基因枪法转化烟草叶片, gus基因瞬时表达表明, EPI序列的存在可以使GUS的表达水平提高. 利用农杆菌法转化烟草, 获得了gus基因稳定表达的植株. GUS活性检测表明EPI内含子的存在可以显著提高GUS基因的表达(P<0.01). Northern blot 分析表明, 在转录水平上gus基因在含EPI内含子的转基因植株中的表达高于不含EPI gus基因的表达, 并且成熟的gus mRNA中EPI被正确剪取掉了, 表明是一种非转译的内含子. GUS定量检测表明, EPI存在可以使GUS的平均表达水平提高3倍, 最高单株可提高6倍.
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| 关 键 词： | 内含子 β-葡糖醛酸酶 表达水平 水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶 |
| 收稿时间： | 2002-10-21 |
| 修稿时间： | 2002-10-21 |
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