| 含组氨酸标签的甲/乙型流感嵌合体假病毒颗粒的构建和表达 |
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| 引用本文： | 张瑾,薛晓宁,徐翮飞,朱可,陈晓光,张娟,张齐,林元.含组氨酸标签的甲/乙型流感嵌合体假病毒颗粒的构建和表达[J].病毒学报,2015,31(6). |
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| 作者姓名： | 张瑾 薛晓宁 徐翮飞 朱可 陈晓光 张娟 张齐 林元 |
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| 作者单位： | 山东国际旅行卫生保健中心,山东出入境检验检疫局,青岛266071;青岛机场出入境检验检疫局,山东出入境检验检疫局,青岛266071 |
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| 基金项目： | 山东出入境检验检疫局科研项目 |
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| 摘 要： | 为了获得内含甲/乙型流感病毒部分序列的病毒样颗粒,本研究通过定点突变技术将6个组氨酸插入MS2噬菌体包膜蛋白的β-发夹环结构中,建立通用表达载体D-pET32a-CP-his。并采用聚合酶链反应扩增甲/乙流病毒cDNA的部分保守区域,将两种病毒的嵌合体基因序列连接到表达载体,转化BL21细胞。经诱导表达和镍柱亲和层析纯化,获得了含有甲/乙型流感病毒部分序列的高浓度和纯度的病毒样颗粒。该病毒样颗粒在4℃和-20℃条件下可稳定保存。本研究构建带有组氨酸纯化标签假病毒的通用表达载体,可以作为以后构建和制备耐RNase的mRNA标准品和质控品的平台;构建的甲/乙型流感嵌合体假病毒可为实验室流感病毒的检测提供新的标准品及质控品。
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| 关 键 词： | 流感病毒 MS2噬菌体 镍离子亲和层析 病毒样颗粒 RT-PCR |
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