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单核细胞增生李斯特氏菌PCR-DHPLC检测新技术的建立
引用本文:曹际娟,闫平平,徐君怡,郑秋月,马惠蕊,谢明杰.单核细胞增生李斯特氏菌PCR-DHPLC检测新技术的建立[J].生物技术通报,2008(Z1).
作者姓名:曹际娟  闫平平  徐君怡  郑秋月  马惠蕊  谢明杰
作者单位:1. 辽宁出入境检验检疫局,大连,110061
2. 辽宁师范大学,大连,116021
3. 辽宁出入境检验检疫局,大连,110061;沈阳农业大学,沈阳,110161
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划课题“食品中微生物高通量检测试剂盒的研制”(课题编号:2006BAK02A13)的部分研究内容
摘    要:应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中单核细胞增生李斯特氏菌fimY的快速检测方法。根据单核细胞增生李斯特氏菌prfA和hlyA基因序列的特点设计特异性引物,PCR扩增的产物经DHPLC技术进行快速检测。以单核细胞增生李斯特氏菌等61株参考菌株做特异性试验;单核细胞增生李斯特氏菌菌株稀释成不同梯度,进行灵敏度试验。试验结果表明该方法具有很好的特异性,灵敏度较高,检测低限可达到为181CFU/ml。可以快速、准确检测单核细胞增生李斯特氏菌,是食品中致病菌快速检测的新技术。

关 键 词:DHPLC  单核细胞增生李斯特氏菌  fimY基因  

Study of Identification of Listeria monocytogenes with PCR-DHPLC
Cao Jijuan,Yan Pingping,Xu Junyi,Zheng Qiuyue,Ma Huirui,Xie Mingjie.Study of Identification of Listeria monocytogenes with PCR-DHPLC[J].Biotechnology Bulletin,2008(Z1).
Authors:Cao Jijuan  Yan Pingping  Xu Junyi  Zheng Qiuyue  Ma Huirui  Xie Mingjie
Institution:1;3;1 Liaoning Entry-Exit Inspection & Quarantine Bureau of P.R.China;Dalian 116001;2 Liaoning Normal University;Dalian 116021;3 Shenyang Agricultural University;Shenyang 110161
Abstract:To identify the prfA and hlyA gene in Listeria rnonocytogenes,a PCR-DHPLC assay was performed in this study.Primers specific for the prfA and hlyA gene in Listeria monocytogenes of food were selected to conduct the DHPLC assays.The specific testing was performed with Listeria monocytogenes and 61 strains,and various grads of Listeria monocytogenes was used for the sensitivity testing.The good specificity was found in the study.Also,the method showed nicer sensitivity with the lowest amount of detecting was ...
Keywords:DHPLC
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