突变型p53Neu/erbB2双转基因鼠的培育—乳腺定位高表达突变型p53Neu/erb32 |
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引用本文: | 李宝林,史元元,等.突变型p53Neu/erbB2双转基因鼠的培育—乳腺定位高表达突变型p53Neu/erb32[J].发育与生殖生物学报,1997,6(1):25-32. |
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作者姓名: | 李宝林 史元元 |
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作者单位: | [1]中国人民解放军农牧大学生化实验室,中国吉林长春130062 [2]中国人民解放军农牧生物工程实验室,中国吉林长春13 |
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摘 要: | 为了研究乳腺癌发生与发展过程中突变型p53和Neu基因之间的相互作用,我们构建了p53/Neu双转基因鼠。用5只成年雄性Neu转基因鼠与10只成年雌性p53转基因鼠交配,对150只雌性杂交后代鼠进行p53/Neu双转基因鼠的筛选。为此,本实验建立了PCR-一步鉴定法。即:在同一个反应管内能同时满足小鼠β-酪蛋白基因、p53基因和Neu基因上三个片段(分别为0.5kb、1.2kb、1.7kb)的扩增反应者被判定为双转基因鼠(Fig.1)。传统的Southern分析(Fig.2)与PCR一步法鉴定结果相吻合。证明:该法的准确率为100%,进一步、随机取样,Northern分析(Fig.3)表明:双转基因鼠(2号)在哺乳第二天即出现p53基因的高。继而、在姓娠第10、17天,哺乳第10、21天也检测到该基因的表达。另外,免疫组化染色也检测到了p53和Neu蛋白(未展示结果)。
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关 键 词: | p53基因突变 Neu基因 转基因鼠 乳腺表达 |
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