直接注射质粒DNA表达人G—CSF的研究

转基因动物研究发展至今，对于所构建煌表达载体有效性如何，一直缺乏一个验证体系。由于转基因动物的建立较为繁琐复杂，投资大，因而直接用转基因动物去验证所用元件是不明智的。为此，我们采用小鼠乳清酸蛋白（WAP）基因（2．6Kb)为调控序列，人G－CSF基因组基因为目的的自然，将WAP第一内含子置于G－CSF基因5’端，构建成转基因动物乳腺表达载体pINGG（Fig.1）。将表达质粒直接注射到怀孕小鼠乳腺。于分婉第8天取乳汗进行ELISA检测。在泌乳期小鼠乳汁中检测出人G－CSF，表达量达15－32ng/mL(Table1)。具有一定应用前景。实验中发现：增加注射次数可以提供转染效率，但最佳注射次数仍需摸索。另外，如果换用复制型载体，整合与表达效率有可能大大提高。