| 核定位信号筛选系统的构建 |
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| 引用本文： | 王冀姝,陈萍,孙强,牛立国,周鹏,张浩,韩骅,苏成芝.核定位信号筛选系统的构建[J].中国生物化学与分子生物学报,2000,16(3):301-305. |
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| 作者姓名： | 王冀姝 陈萍 孙强 牛立国 周鹏 张浩 韩骅 苏成芝 |
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| 作者单位： | 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安 710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助课题(39970376) |
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| 摘 要： | 建立了一酵母克隆系统用于克隆含核定位信号 (NLS)的蛋白质的基因 .用表达转录因子GAL4 DNA结合域 - p53(GAL4- DBD- p53)融合蛋白的质粒转化酵母 HF7c,使 GAL4- DBD- p53可结合于报告基因的启动子但因无转录激活域而不能激活转录 .构建一酵母穿梭载体 ,可表达无NLS的 GAL4转录激活域 -大 T抗原 (GAL4- AD- LT)融合蛋白 .融合蛋白基因的下游插入一多克隆位点 .将 c DNA文库插入多克隆位点后 ,如果 c DNA片段可编码 NLS,则 GAL4- AD- LT分子可进入细胞核 ,并通过 LT与 p53的相互作用而使 GAL4- AD结合于启动子和激活报告基因的转录 .构建了这一克隆系统的各质粒 ,并用绿色荧光蛋白 (GFP)验证了其对核内蛋白和胞浆蛋白的甄别能力 .这一系统将有助于从 c DNA文库中筛选编码带有 NLS的蛋白质的基因
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| 关 键 词： | 核定位信号 出核信号 基因克隆 酵母 |
| 收稿时间： | 2000-06-20 |
| 修稿时间： | 1999年11月5日 |
Selection System for Genes Encoding Nuclear Localization Signal * |
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| WANG Ji shu,CHEN Ping,SUN Qiang,NIU Li guo,ZHOU Peng,ZHANG Hao,HAN Hua,SU Cheng zhi.Selection System for Genes Encoding Nuclear Localization Signal *[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2000,16(3):301-305. |
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| Authors: | WANG Ji shu CHEN Ping SUN Qiang NIU Li guo ZHOU Peng ZHANG Hao HAN Hua SU Cheng zhi |
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| Institution: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology,The Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nuclear localization signal Nuclear export signal Gene cloning Yeast |
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