| LncRNA-GAS5对BCG感染小鼠巨噬细胞后细胞坏死的调控作用 |
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| 作者姓名： | 徐雅楠 于嘉霖 马臣杰 曾瑾 吴晓玲 邓光存 |
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| 作者单位： | 1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021,1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021,1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021,1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021,1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021,1 西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 宁夏 银川 750021;2 宁夏大学生命科学学院 宁夏 银川 750021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31560322，31760324，31760326)；西部一流学科建设重大创新项目(ZKZD2017001)；宁夏科技创新领军人才培养项目(KJT2017002)；宁夏大学研究生创新项目(GIP2018043) |
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| 摘 要： | 【背景】LncRNA-GAS5是由Gas5基因编码的功能性LncRNA分子,对细胞极化、细胞凋亡、坏死和自噬等多种生物学过程具有重要的调控作用。【目的】探讨LncRNA-GAS5对卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7坏死的调控作用。【方法】构建LncRNA-GAS5的过表达及干扰载体,分别转染巨噬细胞RAW264.7后使用BCG感染,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率,通过透射电镜观察细胞坏死形态,利用碘化丙啶(Propidine iodide,PI)单染法流式细胞仪检测细胞坏死率,通过实时荧光定量PCR和Western blot法研究坏死相关调控因子RIP1、RIP3和MLKL的表达水平。【结果】BCG感染巨噬细胞后,LncRNA-GAS5表达水平显著上调;同时,采用LncRNA-GAS5过表达载体单独转染或结合BCG感染后,巨噬细胞存活率均下降且细胞坏死率显著增加。同时坏死关键调控因子RIP1、RIP3和MLKL的mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P0.001),而GAS5干扰载体可有效抑制这一效果。【结论】LncRNA-GAS5通过上调坏死相关因子RIP1、RIP3及MLKL的表达促进BCG感染巨噬细胞后诱导的细胞坏死,研究结果为进一步探讨LncRNA-GAS5对BCG感染巨噬细胞后细胞坏死调控的分子机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | LncRNA-GAS5，RAW264.7细胞，卡介苗，细胞坏死 |
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