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蜱传脑炎病毒跨过血脑屏障的体外实验
引用本文:康晓平,李裕昌,吴晓燕,魏婧靖,郝淮杰,姜涛. 蜱传脑炎病毒跨过血脑屏障的体外实验[J]. 微生物学报, 2019, 59(3): 578-586
作者姓名:康晓平  李裕昌  吴晓燕  魏婧靖  郝淮杰  姜涛
作者单位:军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所, 病原微生物与生物安全国家重点实验室, 北京 100071
基金项目:国家传染病重大专项(2018ZX10711001);国家自然科学基金(81501789);军队后勤科研项目(AWS15J006)
摘    要:【目的】构建蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)跨血脑屏障研究的体外细胞模型,研究2种不同细胞的TBEV培养物在病毒跨过血脑屏障中的主要差异,从而为进一步TBEV跨血脑屏障的分子机制研究奠定基础。【方法】利用人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cells,hCMEC/D3)构建体外血脑屏障的细胞模型。用BHK-21细胞中培养的蜱传脑炎病毒感染人脑微血管内皮细胞,检测TBEV在hCMEC/D3中的复制增殖情况;将TBEV加入体外血脑屏障模型的上层微孔中,用实时荧光定量PCR和噬斑测定的方法检测跨过血脑屏障的病毒量;将感染TBEV的人单核细胞加入血脑屏障模型的上层微孔中,观察渗漏进下层孔中的淋巴细胞,并用实时荧光定量PCR和噬斑测定的方法检测跨过血脑屏障的病毒量。利用伊文思蓝标记的白蛋白确定血脑屏障细胞的渗透率变化。【结果】实时荧光定量PCR和病毒滴度测定结果表明,TBEV不能在hCMEC/D3细胞中复制增殖,也不能直接跨过血脑屏障;然而,人单核细胞THP-1感染TBEV后,尽管单核细胞不能直接携带TBEV跨过血脑屏障,但THP-1中产生的病毒却能跨过血脑屏障模型进入下层孔中,并引起血脑屏障渗透率的增高。【结论】单核细胞有助于TBEV跨过血脑屏障。

关 键 词:蜱传脑炎病毒  血脑屏障  单核细胞
收稿时间:2018-05-13
修稿时间:2018-09-14

In vitro experiment for tick borne encephalitis virus transmitting across the blood brain barrier
Xiaoping Kang,Yuchang Li,Xiaoyan Wu,Jingjing Wei,Huaijie Hao and Tao Jiang. In vitro experiment for tick borne encephalitis virus transmitting across the blood brain barrier[J]. Acta microbiologica Sinica, 2019, 59(3): 578-586
Authors:Xiaoping Kang  Yuchang Li  Xiaoyan Wu  Jingjing Wei  Huaijie Hao  Tao Jiang
Affiliation:State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China,State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China,State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China,State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China,State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China and State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Institute of Microbiology and Epidemiology, Academy of Military Medical Science, Academy of Military Science, Beijing 100071, China
Abstract:
Keywords:tick-borne encephalitis virus  blood brain barrier  monocyte
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