| 两端融合表达几丁质结合结构域提高几丁质酶抗真菌活性 |
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| 引用本文： | 谷天燕,刘晓楠,李玲聪,刘妍池,胡少锋,吕晨茵,刘华,赵国刚. 两端融合表达几丁质结合结构域提高几丁质酶抗真菌活性[J]. 微生物学报, 2019, 59(4): 762-770 |
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| 作者姓名： | 谷天燕 刘晓楠 李玲聪 刘妍池 胡少锋 吕晨茵 刘华 赵国刚 |
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| 作者单位： | 河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000,河北农业大学生命科学学院, 河北 保定 071000 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2017YFD0201100）；河北省留学人员科技活动项目（优秀类）（C2015005015）；农业部饲料生物技术重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 【目的】通过两端融合表达几丁质结合结构域来提高几丁质酶的活性和生物防治植物病原真菌能力。【方法】以苜蓿链霉菌(Streptomyces alfalae)ACCC40021中唯一的GH19家族几丁质酶为模板,构建两端融合表达几丁质结合结构域的几丁质酶,并进行原核表达;利用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)测定几丁质酶活。【结果】成功构建了CatD_(ChiB) (催化结构域)、rChiB (含N-端几丁质结合结构域)、DChBD_(ChiB)(含两端几丁质结合结构域)三种形式的酶,并在大肠杆菌中得到了高效表达;与CatD_(ChiB)和rChiB相比,DChBD_(ChiB)显著地提高了对α-几丁质、胶体几丁质和黑曲霉几丁质的结合能力和活性;同时增强了其对病原真菌长枝木霉的抑制作用。【结论】两端融合表达几丁质结合结构域是简单有效的提高几丁质酶活性及抗真菌活性的策略。
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| 关 键 词： | 碳水化合物结合模块(CBMs) 几丁质结合结构域(ChBD) 苜蓿链霉菌(Streptomyces alfalae) 几丁质酶 植物真菌病害 |
| 收稿时间： | 2018-09-25 |
| 修稿时间： | 2018-10-15 |
Enhancing antifungal activity of chitinase by fusion of chitin binding domain at both termini |
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| Tianyan Gu,Xiaonan Liu,Lingcong Li,Yanchi Liu,Shaofeng Hu,Chenyin Lv,Hua Liu and Guogang Zhao. Enhancing antifungal activity of chitinase by fusion of chitin binding domain at both termini[J]. Acta microbiologica Sinica, 2019, 59(4): 762-770 |
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| Authors: | Tianyan Gu Xiaonan Liu Lingcong Li Yanchi Liu Shaofeng Hu Chenyin Lv Hua Liu Guogang Zhao |
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| Affiliation: | College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China,College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China and College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, Hebei Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | carbohydrate binding modules chitin-binding domain Streptomyces alfalae chitinase phytopathogenic fungi |
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