HCV NS5B蛋白对HCV RNA的模板特异性研究 |
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作者姓名: | 叶力 叶林柏 佘应龙 廖庆姣 吴正辉 郜金荣 孔令保 李宝宗 曾莹春 |
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作者单位: | 武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室,湖北武汉,430072 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助(30070175) |
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摘 要: | 在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中表达并纯化HCV的依赖于RNA的RNA多聚酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp,NS5B蛋白).以HCV正、负链RNA 3′末端的序列为模板,体外研究NS5B蛋白催化的RNA合成.结果显示,正链RNA在体外不能指导RNA合成,而负链RNA模板可以产生一条全长的正链RNA产物,表明NS5B对负链RNA具有模板特异性.NS5B对负链RNA的特异性在模板竞争性实验中得到进一步证实,正链RNA的存在和竞争对以负链为模板的RNA合成没有影响.这样,就合理解释了在HCV RNA复制时正链RNA的数量远比负链RNA多这一问题.同时,本实验的结果也为进一步研究病毒或其它细胞因子参与以正链RNA为模板进行的RNA合成,以及有关负链RNA模板特性的研究奠定了基础.
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关 键 词: | 丙型肝炎病毒(HCV) 依赖于RNA的RNA多聚酶(RdRp) RNA合成 模板特异性 |
文章编号: | 1003-5125(2005)03-0232-07 |
修稿时间: | 2004-11-17 |
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