pIRES2-EGFP-IL-1ra-Fcε真核表达载体的构建及鉴定 |
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引用本文: | 刘中成,王园园,邹民吉,王嘉玺,徐东刚.pIRES2-EGFP-IL-1ra-Fcε真核表达载体的构建及鉴定[J].分子细胞生物学报,2008,41(4). |
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作者姓名: | 刘中成 王园园 邹民吉 王嘉玺 徐东刚 |
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作者单位: | [1]军事医学科学院基础医学研究所,北京100850 [2]河北大学药学院,保定071000 |
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摘 要: | 采用RT-PCR方法从哮喘大鼠脾细胞中克隆IgE恒定区cDNA,同时从载体pBV220-IL-1ra中克隆IL-1ra基因.利用重叠延伸PCR技术构建IL-1ra-Fcε融合基因.将其克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP,以脂质体法转染293T细胞,同时采用气管滴注方式滴注大鼠肺部.经Westernblot、RT-PCR及荧光显微镜观察此融合基因在293T细胞及大鼠肺组织中实现了表达,为过敏性哮喘基因治疗奠定了基础.
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关 键 词: | IL-1ra-Fcε融合基因 转染 真核表达 鉴定 |
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