用斑点酶联免疫吸附试验检测轮状病毒抗原 |
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引用本文: | 于红,邵济钧.用斑点酶联免疫吸附试验检测轮状病毒抗原[J].病毒学报,1990(2). |
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作者姓名: | 于红 邵济钧 |
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作者单位: | 青岛医学院微生物学教研室
(于红),青岛医学院微生物学教研室(邵济钧) |
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摘 要: | 我们用国产试剂和材料建立了一种以硝酸纤维素膜(NCM)作为固相载体的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),用于检测粪标本中的轮状病毒. 首先用铁笔将NCM划成5×5mm的小方格,然后将免抗人轮状病毒IgG打点至方格中心,室温凉干后,置封闭液中室温作用1小时,取出用PBST洗涤3~5次,每次5分钟,然后将膜直接浸入待检粪样、阳性抗原对照和阴性抗原对照中.置37℃ 30~60分钟,洗涤。随后将上述诊断膜浸入酶标兔抗人轮状病毒IgG中,室温45~60分钟,洗涤。用底物DAB显色数分钟,至阳性对照样本出现明显褐色斑点时,用自来水终止反应。根据斑点颜色深浅,肉眼即可判断阳性或阴性结果。
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