嗜热菌Aquifex pyrophilus中mbh2基因簇的鉴定和部分基因的克隆及测序

基于嗜热菌Aquifex aeolicus的mbhS2基因，设计合成特异性引物，以Aquifex pyrophilus的染色体DNA为模板，应用PCR技术扩增出目的片段。序列测定结果显示，其推导出的氨基酸序列与A.aeolicus的相应序列具有85％的同源性。以此PCR片段为探针，从A.pyrophilus的Nco Ⅰ部分基因组文加（4－6kb)中筛选出含5kb大小插入片段的阳性克隆，进而对其进行了亚克隆及测序。结果表明，该插入了包含A.pyrophilus mbh2基因簇的小亚基基因mbhS2,orf1基因的部分orf2基因。所推导出的氨基酸序列与A.aeolicus的MbhS2和Orf963相比较的同源性分别为81％和60％。