| SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测埃博拉病毒方法的建立 |
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| 作者姓名： | 刘阳 史子学 马玉堃 王皓婷 王宗尧 邵东华 魏建超 王少辉 李蓓蓓 王水明 刘学辉 马志永 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室,上海200241;黑龙江大学生命科学学院,哈尔滨150080;中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室,上海,200241;黑龙江大学生命科学学院,哈尔滨,150080;南京出入境检验检疫局,南京,211136 |
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| 基金项目： | 江苏出入境检验检疫局科研项目(2011KJ03);公益性行业(农业)科研专项经费(200903037-06) |
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| 摘 要： | 为了建立一种快速准确的检测埃博拉病毒(EBOV)亚型的方法。本研究根据GenBank中公布的EBOV NP基因序列,通过设计引物和优化反应条件,建立了一种SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法检测EBOV。以体外转录的EBOV RNA为模板进行试验,该方法检测的灵敏度可以达到1.0×102个拷贝/μL,检测范围达到9个数量级为102～1010,可检测5种亚型EBOV。建立的方法对马尔堡病毒(MARV)、登革病毒(DENV)、新疆出血热病毒(XHFV)、乙型脑炎病毒(JEV)、流感病毒(H1N1和H3N2)和猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)E基因组RNA无非特异性扩增。本文将荧光定量RT-PCR技术用于埃博拉病毒的定量检测中,并且建立了EBOV SYBRGreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法。
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| 关 键 词： | 埃博拉病毒 荧光定量 RT-PCR SYBR Green Ⅰ 检测 |
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