| 米曲霉尿嘧啶营养缺陷型突变体筛选及转化体系建立 |
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| 引用本文： | 秦坤海,刘琪聪,黄慧,曾斌,胡志宏.米曲霉尿嘧啶营养缺陷型突变体筛选及转化体系建立[J].微生物学杂志,2023(1):51-56. |
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| 作者姓名： | 秦坤海 刘琪聪 黄慧 曾斌 胡志宏 |
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| 作者单位： | 1.江西科技师范大学 生命科学学院，江西 南昌 330013;2.江西科技师范大学 江西省生物加工过程重点实验室，江西 南昌 330013;1.江西科技师范大学 生命科学学院，江西 南昌 330013;2.江西科技师范大学 江西省生物加工过程重点实验室，江西 南昌 330013；3.深圳技术大学 药学院，广东 深圳 518118 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31700068）；江西省科技厅青年重点项目（20192ACBL20012）；江西省教育厅自然科学基金项目（GJJ201141）；江西科技师范大学青年拔尖人才项目（2019QNBJRC004） |
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| 摘 要： | 米曲霉(Aspergillus oryzae)是一种十分重要的工业微生物，但由于其菌丝体和孢子均含有多个细胞核，并且对多种抗性药物具有抗性，导致其遗传转化和分子生物学研究较其他模式丝状真菌困难。目前米曲霉遗传转化主要采用营养缺陷型作为筛选标记。尿嘧啶营养缺陷型是米曲霉转化中最常用的一种营养缺陷型标记，其筛选标记基因pyrG编码乳清酸核苷-5′-磷酸脱羧酶为尿嘧啶的前体尿苷合成所必需。本研究以米曲霉3.042为背景，利用紫外线诱变和5-氟乳清酸(5-FOA)胁迫筛选获得5株尿嘧啶营养缺陷型菌株，经DNA测序5株菌株均为pyrG基因不同位点突变，确定为尿嘧啶营养缺陷型。以筛选到的尿嘧啶营养缺陷型菌株为背景，利用农杆菌介导的米曲霉转化系统，成功构建了米曲霉尿嘧啶营养缺陷型为筛选标记的农杆菌转化体系。
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| 关 键 词： | 米曲霉3.042 尿嘧啶营养缺陷型 农杆菌转化 紫外线诱变 5-氟乳清酸 |
Screening of Uracil Auxotrophic Mutants of Aspergillus oryzae and Establishment of Transformation System |
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| QIN Kun-hai,LIU Qi-cong,HUANG Hui,ZENG Bin,HU Zhi-hong.Screening of Uracil Auxotrophic Mutants of Aspergillus oryzae and Establishment of Transformation System[J].Journal of Microbiology,2023(1):51-56. |
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| Authors: | QIN Kun-hai LIU Qi-cong HUANG Hui ZENG Bin HU Zhi-hong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aspergillus oryzae 3 042 uracil auxotroph Agrobacterium transformation UV mutagenesis 5-fluorowhey acid |
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