鸭乙型肝炎病毒核心抗原DNA 疫苗的构建及其诱导的体液免疫应答 |
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引用本文: | 蒋定锋,闫梁,贲海静,赵艳丰,秦智强,瞿涤.鸭乙型肝炎病毒核心抗原DNA 疫苗的构建及其诱导的体液免疫应答[J].微生物与感染,2009,4(3):140-145. |
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作者姓名: | 蒋定锋 闫梁 贲海静 赵艳丰 秦智强 瞿涤 |
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作者单位: | 复旦大学上海医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室,上海,200032 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家基础科学人才培养基金项目 |
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摘 要: | 为研究鸭乙型肝炎病毒核心抗原( DHBcAg) 真核表达质粒的免疫原性, 分析DHBcAg DNA 疫苗诱导的体液免疫应答, 首先借助生物信息学方法对鸭乙型肝炎病毒( DHBV) Core 基因编码的氨基酸序列进行亲疏水性分析, 分别构建DHBcAg 全基因( E-DHBc263) 及去除疏水性序列的DHBcAg 片段( E-DHBc180) 的真核表达质粒, 间接免疫荧光检测结果显示可在COS7 细胞内表达。进一步构建原核表达质粒p-DHBc263 和p-DHBc180, 仅p-DHBc180 可表达蛋白, 纯化后作为酶联免疫吸附试验( ELISA) 包被抗原, 用于DHBcAb 的检测。分别用E-DHBc263 和E-DHBc180 免疫小鼠, 采用间接ELISA 检测DHBcAb。结果显示, E-DHBc180 可诱导免疫小鼠产生DHBcAb 免疫应答, 加强免疫后效价可达1∶100 ~1∶400。结果提示, E-DHBc180 可作为DHBcAg DNA 疫苗, 在DHBV 感染鸭模型中评价其效果。
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关 键 词: | 核心抗原 克隆 DNA 疫苗 |
Construction of duck hepatitis B virus core antigen DNA vaccine and induced humoral immune response |
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Abstract: | |
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