| 酵母整合型载体的构建及其功能分析 |
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| 引用本文： | 武志强,贾耐兵,李娜,王瑞菊,马百成,王翠艳,李明刚.酵母整合型载体的构建及其功能分析[J].生物学通报,2008,43(5):47-50. |
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| 作者姓名： | 武志强 贾耐兵 李娜 王瑞菊 马百成 王翠艳 李明刚 |
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| 作者单位： | 1. 南开大学生命科学学院分子生物学研究所,天津,300071
2. 天津出入境检验检疫局,天津,300071 |
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| 摘 要： | 选取酿酒酵母基因组rDNA序列中25S和5S rDNA之间的一段约2.2 kb序列作为整合载体同源重组到酿酒酵母基因组中的靶位点,PCR扩增得到该段序列左右2段大小分别为865 bp和1 350 bp的片段,将其与 URA3、磷酸丙糖异构酶启动子和终止子序列依次克隆入pUC18中,构建成整合型载体pNK.以绿色荧光蛋白基因为报告基因,荧光显微镜下观察到酿酒酵母菌株INVSc1转化子发出较强荧光,Southern 杂交产生目的条带,这些结果表明载体 pNK 具有整合并表达外源基因功能.通过对转化子连续培养证明构建的整合型载体的稳定性较高.
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| 关 键 词： | 酿酒酵母 rDNA 整合载体 磷酸丙糖异构酶 绿色荧光蛋白 酵母菌株 整合型 载体 稳定性 连续培养 基因功能 表达 结果 杂交 Southern 强荧光 转化子 镜下观察 荧光显微 报告基因 蛋白基因 绿色荧光 克隆 子序列 启动 |
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