转录抑制因子GCF2促进肝癌细胞BEL-7404迁移相关靶基因的初步鉴定 |
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引用本文: | 吴博,晁耐霞,赵飞兰,李金平,陈力,陈德凤,黄天明,莫发荣,张琪惠,罗国容.转录抑制因子GCF2促进肝癌细胞BEL-7404迁移相关靶基因的初步鉴定[J].基因组学与应用生物学,2015(1):35-40. |
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作者姓名: | 吴博 晁耐霞 赵飞兰 李金平 陈力 陈德凤 黄天明 莫发荣 张琪惠 罗国容 |
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作者单位: | 广西医科大学组织胚胎学教研室;广西医科大学生物化学与分子生物学教研室;广西中医药大学组织胚胎学教研室;广西桂林医学院组织胚胎学教研室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金地区基金(81060168,81260313);广西自然科学基金青年基金项目(2014GXN-SFBA118157);广西医科大学青年科学基金(No.GXMUYSF201343)共同资助 |
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摘 要: | GCF2是转录抑制因子,为了研究GCF2蛋白在肝癌细胞BEL-7404迁移中的作用,并根据芯片结果验证GCF2调控参与迁移的靶基因,我们采用siR NA沉默GCF2蛋白表达,然后通过transwell实验检测GCF2沉默前后BEL-7404细胞迁移的变化,最后荧光定量RT-PCR和Western blot验证芯片结果中与迁移相关基因的表达。研究结果显示siR NA干扰GCF2成功后进行迁移实验,si RNA-GCF2组,FAM-siR NA-NC组,脂质体组,和未处理野生型BEL-7404组24 h后细胞穿过8滋m微孔滤膜的数目(x±s)分别为41.66±1.52、41.66±1.15、41.33±1.5、18.66±0.577,差异均有统计学意义(p约0.01)。QRT-PCR验证9个候选基因中,MyD 88在si RNA-GCF2组内表达显著高于其余三组(p约0.05)。Western blot检测siR NA干扰GCF2后肝癌细胞BEL-7404的MyD 88的蛋白表达显著高于其余三组(p约0.05)。结果表明si RNA沉默转录因子GCF2蛋白表达可抑制肿瘤细胞BEL-7404迁移,推测GCF2作为转录因子可能通过抑制靶基因MyD 88的表达参与细胞的迁移。
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关 键 词: | 原发性肝细胞肝癌 GCF2 细胞迁移 小干扰RNA MyD88 |
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