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联合β-半乳糖苷酶和L-阿拉伯糖异构酶法合成D-塔格糖的研究
作者姓名:张留权  王玥  丁庆豹  欧伶  许彦梅  张春艳  魏晓琨
作者单位:张留权 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237) ; 王玥 (天津科技大学生物工程学院,天津,300457) ; 丁庆豹 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237) ; 欧伶 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237) ; 许彦梅 (上海斯贝生物科技有限公司,上海,200235) ; 张春艳 (上海斯贝生物科技有限公司,上海,200235) ; 魏晓琨 (上海斯贝生物科技有限公司,上海,200235) ;
摘    要:将大肠杆菌K-12中的B-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖异构酶基因araA以串联方式克隆到载体pET-28a(+)上,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过SDS—PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性B.半乳糖苷酶蛋白和L-阿拉伯糖异构酶蛋白。以重悬菌液为酶源,可将乳糖降解为D-半乳糖,并将D-半乳糖转化为D-塔格糖。在温度为50℃,pH7.0的缓冲液中,经一段时间反应后,D-塔格糖的转化率可达21%以上。加入Mn^2+、Co^2+和Fe^2+均能够使D-塔格糖的转化率提高。

关 键 词:大肠杆菌  L-阿拉伯糖异构酶  B-半乳糖苷酶  D-塔格糖
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