| 利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建 |
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| 引用本文： | 孙辉,祝建波. 利用简并引物克隆天山雪莲sikPIP基因片段及RNAi载体的构建[J]. 生物技术通报, 2010, 0(6) |
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| 作者姓名： | 孙辉 祝建波 |
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| 作者单位： | 石河子大学生命科学学院,农业生物技术重点实验室,石河子,832003 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家转基因重大专项 |
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| 摘 要： | 利用NCBI、Bloekmaker、CODEHOP、Primer Premier5.0等数据库和生物软件设计简并引物并利用简并引物RT-PCR,首次从天山雪莲中克隆到474bp的PIP基因cDNA片段,命名为sikPIP,其与GenBank中非洲杂交菊PIP基因氨基酸序列的同源性高达93.0%。从上述序列中选取200bp的序列,利用2对同尾酶将正义片段和反义片段插入到植物表达载体CAM2300-35S-Ocs中,成功构建天山雪莲RNAi载体CAM2300-35S-Ocs-sikPIP。为接下来的遗传转化,进一步探明sikPIP基因在天山雪莲中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 天山雪莲 简并引物 |
Cloning of sikPIP Gene cDNA Fragment of S.involucrata Kar.et Kir. by Degenerate Primers and Construction of RNAi Vector |
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| Sun Hui,Zhu Jianbo. Cloning of sikPIP Gene cDNA Fragment of S.involucrata Kar.et Kir. by Degenerate Primers and Construction of RNAi Vector[J]. Biotechnology Bulletin, 2010, 0(6) |
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| Authors: | Sun Hui Zhu Jianbo |
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| Keywords: | sikPIP RNAi |
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