ＴＮＦ—α基因在鱼腥藻７１２０中的表达及其产物的亲和层纯化

用转入ＴＮＦ－α基因并稳定有达了４年多的丝状体蓝藻－鱼腥藻７１２０（Anabaena sp.PCC7120)，研究比较了在培养液中氨源（NaNO3)和碳源（NaAc)对转基因灌生长和ＴＮＦ－α基因的不同影响，氨源能稳定外源蛋白的表达，而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较不同的破碎细胞的方法，发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和ＴＮＦ－α含量均要比冻融法高出１倍左右，经过细胸破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相色析后，除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质，最后通过亲和柱层析，分离出了纯的目标蛋白－重组肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）。经凝胶电泳鉴定为单一的谱带，分子量为１７kD。