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| 大鼠前列腺素D合成酶在毕赤酵母中的表达及其在精子中的分布 | |
| 引用本文： | 陈德宇, 周开亚, 黄宇烽,.大鼠前列腺素D合成酶在毕赤酵母中的表达及其在精子中的分布[J].生物工程学报,2004,20(6):896-900. |
| 作者姓名： | 陈德宇 周开亚 黄宇烽 |
| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学院,南京,210097;阜阳师范学院生物系,阜阳,230632 2. 南京师范大学生命科学院,南京,210097 3. 南京军区总医院生殖遗传实验室,南京,210002 |
| 基金项目： | 南京军区总医院科研基金项目 (No .2 0 0 40 78)，安徽省教育厅自然科学计划项目 (No .2 0 0 2kj2 3 6)~~ |
| 摘 要： | 研究大鼠L PGDS在毕氏酵母中的表达 ,探讨L PGDS在大鼠精子中的分布。以大鼠睾丸mRNA为模板 ,经逆转录获得L PGDS全长和成熟基因片段。将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115 ,筛选mut+表型 ,经甲醇诱导实现L PGDS的分泌表达。用SDS-PAGE分析L-PGDS的分子量 ,用PAS反应鉴定糖链 ,用免疫组织化学法研究L PGDS的分布 ,用Westernblot分析重组L-PGDS与精浆中L-PGDS。筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS-PAGE分析表明 ,产物分子量约为27kD ;L-PGDS主要分布在精子的头部以及尾部的上段 |
| 关 键 词： | 前列腺素D合成酶 毕赤酵母 分布 |
| 文章编号： | 1000-3061(2004)06-0896-05 |
| 修稿时间： | 2004年3月15日 |
Expression of Rat L-PGDS by Pichia pastoris and Distribution of L-PGDS on Sperm |
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| CHEN De_Yu , ZHOU Kai_Ya HUANG Yu-Feng.Expression of Rat L-PGDS by Pichia pastoris and Distribution of L-PGDS on Sperm[J].Chinese Journal of Biotechnology,2004,20(6):896-900. | |
| Authors: | CHEN De_Yu ZHOU Kai_Ya HUANG Yu-Feng |
| Institution: | CHEN De_Yu 1,3 ZHOU Kai_Ya 1 HUANG Yu-Feng 2* 1 |
| Abstract: | To investigate the expression of rat L-PGDS by Pichia pastoris and to study the distribution of L-PGDS on sperm. The cDNA of rat Lipocalin-type prostaglandin D synthase was cloned by RT-PCR using mRNA of rat testis as template. The L-PGDS cDNA was inserted into plasmid pPIC9 and transformed into Pichia pastoris GS115 cells. Using SDS-PAGE to analysis the molecular weight of L-PGDS, immunohistochemical method was performed to study the distribution of L-PGDS on sperm, and Western blot method was performed to study the specific of L-PGDS. The molecular weight of recombinant L-PGDS is 27kD. L-PGDS is mainly distributed on sperm. |
| Keywords: | lipocalin-type prostaglandin D synthase Pichia pastoris distribution |
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