重组人GM—CSF／MCAF融合蛋白的变性、复性及纯化研究

医学科学院生物工程研究所 北京 100071)摘 要 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和单核细胞趋化激活因子(MCAF)融合蛋白在大肠杆菌中高效表达后，表达产物以包涵体形式存在。包涵体经分离和洗涤后，探索了rhGM—CSF／MCAF变性和复性的合适条件。复性后的样品经Sephadex G-75凝胶过滤和CM—Sepharose FF离子交换两步层析，得到了具有生物学活性的SDS—PAGE纯的rhGM-CSF／MCAF。Western blot检测表明，纯化的rhGM—CSF／MCAF能分别与GM—CSF和MCAF抗体发生特异反应。