| 苏云金芽孢杆菌cryIA（c）Bt基因的合成及其在大肠杆菌中稳定表达 |
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| 引用本文： | 彭日荷 熊爱生 等. 苏云金芽孢杆菌cryIA（c）Bt基因的合成及其在大肠杆菌中稳定表达[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2001, 33(2): 219-224 |
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| 作者姓名： | 彭日荷 熊爱生 等 |
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| 作者单位： | [1]上海市农业遗传重点实验室、上海市农业科学院生物中心，上海201106 [2]上海市农业遗传重点实验室、上海市农业科 |
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| 摘 要： | 选用荧光假单孢菌偏爱密码，设计长90bp左右的寡核苷酸引物，采用连续延伸PCR方法，合成了全长1.8kb的苏云金芽孢杆菌cryIA(c)Bt基因。合成基因消除了潜在的polyA加尾序列、mRNA不稳定序列以及发夹结构。和Perlak发表的序列相比，合成的cryIA(c)Bt基因改动了614个核苷酸，G＋C的含量从37.2％上升到64％。将合成基因由tac启动子调控，构建成Bt表达载体pYPBts。转化大肠杆菌后，在菌体内大量合成66kD大小的蛋白质分子，其含量占菌体总蛋白质的30％。生物测定结果表明，表达的蛋白质对菜青虫三龄幼虫有很高的杀灭活性，LD50为0.024μg/cm^2。
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| 关 键 词： | 化学合成 cryIA（c）Bt 基因表达 杀虫活性 苏云金芽孢杆菌 微生物杀虫剂 |
PCR-aided Synthesis and Stable Expression in E.coli of the cryIA(c)Bt Gene |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chemical synthesis cryIA(c)Bt gene gene stable expression insecticide activity |
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