| 人血管内皮生长因子（VEGF165）在毕氏酵母中的表达及生物活性分析 |
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| 引用本文： | 马骊,王小宁,等.人血管内皮生长因子（VEGF165）在毕氏酵母中的表达及生物活性分析[J].生物化学与生物物理学报,2001,33(3):325-330. |
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| 作者姓名： | 马骊 王小宁 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所!广州510515，中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所!广州510515 |
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| 基金项目： | 国家高技术“86 3”计划资助课题!No.10 2 0 8 0 1 0 3，广东省自然科学基金资助项目!No，0 0 10 98，高等学校骨干教师资助计划项目 |
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| 摘 要： | 采用PCR扩增hVEGF165基因，经DNA序列分析后，插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichi a pastoris酵母表达载体中，构建重组质粒pPIC9K/hVEGF165，经转化酶母宿主菌KM71，筛选多拷贝整合转化子，摇瓶培养，1％甲醇诱导表达。 表达产物在Heparin-Sepharose CL6B亲和层析经后，以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）测定其生物学活性。SDS－PAGE分析显示，表达产物以可溶性分子形式存在上清中，诱导4天的表达量达上清总蛋白质的60％以上。Western印迹表明，表达产物具有良好的抗原性和特异性。经Heparin-SepharoseCL6B亲和层析纯化，rhVEGF165的纯度可达到90％以上。体内、外生物学活性研究证实其具有刺激HUVEC增殖和促进肢体缺血性动物模型侧枝循环建立的功能。
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 基因表达 生物活性 毕氏酵母 |
Expression, Purification and Biological Activity Analysis of Human Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF_(165)) in Pichia pastoris |
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| MA Li,WANG Xiao Ning.Expression, Purification and Biological Activity Analysis of Human Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF_(165)) in Pichia pastoris[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2001,33(3):325-330. |
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| Authors: | MA Li WANG Xiao Ning |
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| Institution: | MA Li,WANG Xiao Ning * |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VEGF Pichia pastoris gene expression |
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